アッセイID: U076 | 報告日: 2007/05/29 | 所属: 東京大学分子細胞生物学研究所生体有機化学研究分野 | アッセイ者名: 小林久芳 | アッセイ名: イネいもち病菌分生子菌糸に対する表現スクリーニング法の適用範囲と応用性 |
概要 微生物の形態変化をモニターするスクリーニング法は以前から報告されている。私達はrhizoxin などの微小管重合阻害剤がイネいもち病菌(Pyricularia oryzae P-2b)分生子菌糸に対し湾曲作用を示すことを利用し、新規微小管重合阻害剤を発見してきた。今回、標準阻害剤キット1および2を用いPyricularia oryzae による表現スクリーニング法の適用範囲と応用性について評価を行った。 微小管作用物質のうちnocodazole はrhizoxinと同様に菌糸の湾曲を伴った強い形態異常を示した。一方、菌糸に膨潤作用を示すものは Na ionophoreのmonensin、K ionophoreのnigericinやglycosylation 阻害剤のtunicamycinそしてlipoxgenase阻害剤のNDGAとETYAである。菌糸先端に特徴的な細かな縮れを起こしたのは免疫抑制剤のcyclosprin AとFK-506である。HDAC 阻害剤のtrichostatin Aとscriptaidも強弱の差はあるが形態異常を示すことが判明した。他にも分生子発芽阻害作用や菌糸の生育阻害作用を持つものを確認した。 |
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評価のクライテリア 実験は50μM〜0.4μMの濃度範囲で行い、化合物濃度による変化も確認した。菌糸の湾曲や膨潤などを菌糸の形態異常と表現した。また発芽阻害、伸長抑制活性を確認し、これら全てを顕微鏡による写真データとして保存した。なお各Wellの評価結果は 12.5μM のデータを示した。 |
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発表論文 | レポート提出者によるレポート内容の最終確認日: 2013/10/30 |
Well | KIT 1 | KIT 2 | ||
compound | 結果 | compound | 結果 | |
1 - A | none (DMSO) | - | none (DMSO) | - |
1 - B | 5-FU | - | Pifithrin-a (cyclic) | 伸長抑制 |
1 - C | Bestatin Hydrochloride | - | PRIMA-1 | - |
1 - D | Bleomycin sulfate | 発芽阻害 | Finasteride | - |
1 - E | Cisplatin | - | Aminoglutethimide | - |
1 - F | Methotrexate | - | Formestane | - |
1 - G | Mitomycin C | - | Mifepristone | 形態異常 |
1 - H | Vinblastine sulfate | - | TOFA | 形態異常 |
2 - A | Paclitaxel | - | Amastatin | - |
2 - B | Flutamide | - | Actinonin | - |
2 - C | Daunorubicin, HCl | - | Oligomycin | 発芽阻害 |
2 - D | Doxorubicin, HCl | 伸長抑制 | Bafilomycin A1 | 発芽阻害 |
2 - E | Tamoxifen, citrate | 伸長抑制 | HA 14-1 | 弱い形態異常 |
2 - F | Actinomycin D | 伸長抑制 | BH3I-1 | - |
2 - G | Camptothecin | 伸長抑制 | LFM-A13 | - |
2 - H | Aclarubicin | 形態異常 | Terreic acid | - |
3 - A | Etoposide (VP-16) | - | E-64d | - |
3 - B | Cytochalasin D | - | ALLN | - |
3 - C | 2',5'-dideoxyadenosine | - | CA-074 | - |
3 - D | AKT inhibitor | - | Pepstatin A | - |
3 - E | NL-71-101 | - | Z-GLF-CMK | - |
3 - F | AG957 | 弱い形態異常 | RS 102895 | - |
3 - G | KN93 | 弱い形態異常 | SB 328437 | - |
3 - H | Z-VAD-FMK | - | SB 225002 | 弱い伸長抑制 |
4 - A | Kenpaullone | - | AMD3100 octahydrochloride | - |
4 - B | Purvalanol A | 弱い伸長抑制 | NSC95397 | 発芽阻害 |
4 - C | 3-ATA | - | SC-ααδ9 | 形態異常 |
4 - D | Olomoucine | - | Amiloride | 形態異常 |
4 - E | TBB | - | Lidocaine | - |
4 - F | Sulindac sulfide | - | Monensin | 形態異常 |
4 - G | Valeryl salicylate | - | Ouabain | - |
4 - H | NS-398 | - | Sanguinarine | 発芽阻害 |
5 - A | Sodium salicylate | - | Glibenclamide | - |
5 - B | Theophylline | - | Dequalinium | 発芽阻害 |
5 - C | Azacytidine | - | Diazoxide | - |
5 - D | Aphidicolin | - | Valinomycin | 発芽阻害 |
5 - E | AG1478 | - | Nigericin | 形態異常 |
5 - F | Genistein | - | Diltiazem | - |
5 - G | Manumycin A | 発芽阻害 | Nifedipine | - |
5 - H | FTI-276 | - | Verapamil | - |
6 - A | SU1498 | 形態異常 | PGP-4008 | - |
6 - B | GGTI-286 | - | Fumitremorgin C | - |
6 - C | Dexamethasone | - | A23187 | 発芽阻害 |
6 - D | GSK-3 inhibitor II | 弱い伸長抑制 | Ionomycin | 弱い形態異常 |
6 - E | Scriptaid | - | Thapsigargin | 形態異常 |
6 - F | Trichostatin A | 形態異常 | t-Butylhydroquinone (BHQ) | - |
6 - G | AG825 | - | N-phenylanthranilic acid | - |
6 - H | Cycloheximide | 発芽阻害 | DIDS | - |
7 - A | Lovastatin | - | SB 218078 | - |
7 - B | Radicicol | - | Debromohymenialdisine (DBH) | - |
7 - C | 17-AAG | - | Rotenone | 伸長抑制 |
7 - D | AG1024 | 発芽阻害 | Antimycin A1 | 伸長抑制 |
7 - E | 1400W, HCl | - | Leptomycin B* | - |
7 - F | AMT, HCl | - | R59022 | 弱い伸長抑制 |
7 - G | AG490 | - | Dioctanoylglycol | - |
7 - H | Cucurbitacin I | - | RHC80267 | - |
8 - A | SP600125 | 伸長抑制 | Xanthohumol | 発芽阻害 |
8 - B | Damnacanthal | 発芽阻害 | C75 | - |
8 - C | PD 98059 | 弱い伸長抑制 | Cerulenin | 形態異常 |
8 - D | U0126 | 伸長抑制 | Tunicamycin | 形態異常 |
8 - E | Fumagillin | - | Deoxynojirimycin | - |
8 - F | GM 6001 | - | Swainsonine | - |
8 - G | N-Acetyl-L-cysteine | - | LY 83583 | 発芽阻害 |
8 - H | Aminoguanidine, HCl | - | ODQ | - |
9 - A | L-NMMA | - | Anacardic acid | 弱い形態異常 |
9 - B | PD169316 | - | Chetomin | 弱い形態異常 |
9 - C | SB 203580 | - | Dimethyloxalylglycine | - |
9 - D | Rapamycin | 形態異常 | HR22C16 | - |
9 - E | NU1025 | - | Monastrol | - |
9 - F | Benzamide | - | Nordihydroguaiaretic acid (NDGA) | 形態異常 |
9 - G | D609 | - | ETYA | 発芽阻害 |
9 - H | IBMX | - | Baicalein | - |
10 - A | Ro-20-1724 | - | Nutlin-3 | - |
10 - B | Zaprinast | - | MDM2 inhibitor | 形態異常 |
10 - C | AG1296 | - | Phenelzine | - |
10 - D | LY294002 | 弱い伸長抑制 | Deprenyl | - |
10 - E | Wortmannin | 弱い形態異常 | Decylubiquinone | 形態異常 |
10 - F | H-89, HCl | - | Ro 5-4864 | - |
10 - G | Bisindolymaleimide I, HCl | - | Lonidamine | - |
10 - H | H-7 | - | ML-7 | - |
11 - A | Staurosporine | 発芽阻害 | Benzylguanine | - |
11 - B | cPLA2inhibitor | - | DFMO | - |
11 - C | OBAA | - | KT 5823 | 形態異常 |
11 - D | Cantharidin | - | Rp-8-CPT-cGMPS | - |
11 - E | Cytostatin | - | MK 886 | - |
11 - F | Cyclosporin A | 形態異常 | Clofibrate | - |
11 - G | FK-506 | 形態異常 | BADGE | - |
11 - H | MG-132 | - | Troglitazone | 発芽阻害 |
12 - A | Lactacystin | - | AZT | - |
12 - B | Hydroxyurea | - | Nalidixic acid | - |
12 - C | HA1077 | - | a-Amanitin | - |
12 - D | Y27632 | - | MST-312 | - |
12 - E | PP1 (analog) | 形態異常 | b-Rubromycin | 発芽阻害 |
12 - F | PP-H | - | SB 431542 | - |
12 - G | Nocodazole | 形態異常 | N1,N12-Diethylspermine (BESpm) | - |
12 - H | Dephostatin | 伸長抑制 | Fumonisin B1 | - |