化学療法基盤支援活動及びユーザによる評価結果

アッセイの概要

アッセイID：　U008	報告日：　2007/05/20	所属：　順天堂大学医学部生化学第一講座	アッセイ者名：　上野　隆	アッセイ名：　オートファジー誘導活性（Panc-1）
概要昨年8月標準阻害剤キットⅠ-Ⅲを用いて、HeLa細胞を対象にしたオートファジー阻害剤スクリーニング法を報告いたしました。HeLa細胞は標準的な培養細胞系としてオートファジー研究によく用いられていますが、HeLaとの比較を行う目的で、PANC-1膵がん細胞についても同じアッセイ法を適用して阻害活性を測定しました。その結果、添付のエクセルファイルのように両方の細胞で得られた結果はよく一致することが解りました。私の行ったアッセイの原理は、栄養、特にアミノ酸が欠乏している条件下で細胞が死にやすくなることがオートファジー阻害の表現型であるということを仮定しています。そこで得られた結果を基に、これまでオートファジーを阻害するとは報告されていなかった化合物であるCucurbitacin Iについて、現在さらにオートファジーを評価する他の方法でその可能性をさらに検討している段階です。
評価のクライテリア
発表論文				レポート提出者によるレポート内容の最終確認日：　-

評価結果の詳細（評価のクライテリアに基づいて陽性と判断された化合物については背景色を黄色にしています．）

Well	KIT 1		KIT 2		KIT 3
Well	compound	結果	compound	結果	compound	結果
1 - A	none (DMSO)		none (DMSO)		none (DMSO)
1 - B	5-FU		Pifithrin-a (cyclic)		ABT-702
1 - C	Bestatin Hydrochloride		PRIMA-1		Akt Inhibitor IV	Yes
1 - D	Bleomycin sulfate		Finasteride		Akt Inhibitor VIII, Isozyme-Selective, Akti-1/2	Yes
1 - E	Cisplatin		Aminoglutethimide		Akt Inhibitor XI
1 - F	Methotrexate		Formestane		compound C
1 - G	Mitomycin C		Mifepristone		ATM/ATR kinase inhibitor
1 - H	Vinblastine sulfate		TOFA		ATM kinase inhibitor
2 - A	Paclitaxel		Amastatin		Aurora kinase/cdk inhibitor
2 - B	Flutamide		Actinonin		Aurora kinase inhibitor II
2 - C	Daunorubicin, HCl		Oligomycin		Aurora kinase inhibitor III
2 - D	Doxorubicin, HCl		Bafilomycin A1	Yes	AG957
2 - E	Tamoxifen, citrate		HA 14-1		LFM-A13
2 - F	Actinomycin D		BH3I-1		Terreic acid
2 - G	Camptothecin		LFM-A13		KN-93
2 - H	Aclarubicin		Terreic acid		KN-62	Yes
3 - A	Etoposide (VP-16)		E-64d		Lavendustin C
3 - B	Cytochalasin D		ALLN		Kenpaullone
3 - C	2',5'-dideoxyadenosine		CA-074		purvalanol A
3 - D	AKT inhibitor		Pepstatin A		Olomoucine
3 - E	NL-71-101		Z-GLF-CMK		Alsterpaullone, 2-cyanoethyl
3 - F	AG957		RS 102895		Cdk1/2 inhibitor III
3 - G	KN93	Yes	SB 328437		Cdk2/9 inhibitor
3 - H	Z-VAD-FMK		SB 225002		NU6102
4 - A	Kenpaullone		AMD3100 octahydrochloride		Cdk4 inhibitor
4 - B	Purvalanol A		NSC95397		NSC625987
4 - C	3-ATA		SC-ααδ9		SB218078
4 - D	Olomoucine		Amiloride		isogranulatimide
4 - E	TBB		Lidocaine		Chk2 inhibitor
4 - F	Sulindac sulfide		Monensin		Chk2 inhibitor II
4 - G	Valeryl salicylate		Ouabain		Ellagic acid　(Dihydrate)
4 - H	NS-398		Sanguinarine	Yes	TBB
5 - A	Sodium salicylate		Glibenclamide		DMAT
5 - B	Theophylline		Dequalinium		D4476
5 - C	Azacytidine		Diazoxide		TG003
5 - D	Aphidicolin		Valinomycin	No	Diacylglycerol kinase inhibitor II
5 - E	AG1478		Nigericin		IC60211
5 - F	Genistein		Diltiazem		TX-1918
5 - G	Manumycin A		Nifedipine		BPIQ-Ⅱ
5 - H	FTI-276		Verapamil		AG1478
6 - A	SU1498		PGP-4008		AG490
6 - B	GGTI-286		Fumitremorgin C		SU4984
6 - C	Dexamethasone		A23187	Yes	SU5402
6 - D	GSK-3 inhibitor II		Ionomycin	Yes	Flt-3 Inhibitor
6 - E	Scriptaid		Thapsigargin	Yes	cFMS Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor
6 - F	Trichostatin A		t-Butylhydroquinone (BHQ)		SU6656
6 - G	AG825		N-phenylanthranilic acid		GSK-3 inhibitor IX	No
6 - H	Cycloheximide		DIDS		1-Azakenpaullone
7 - A	Lovastatin		SB 218078		Indirubin-3'-monoxime
7 - B	Radicicol		Debromohymenialdisine (DBH)		AG825
7 - C	17-AAG		Rotenone		AG1024
7 - D	AG1024		Antimycin A1		AGL 2263
7 - E	1400W, HCl		Leptomycin B*		BMS-345541
7 - F	AMT, HCl		R59022		IKK-2 inhibitor VI
7 - G	AG490		Dioctanoylglycol		IRAK-1/4 inhibitor
7 - H	Cucurbitacin I	Yes	RHC80267		JAK Inhibitor I
8 - A	SP600125		Xanthohumol		JAK3 Inhibitor VI
8 - B	Damnacanthal		C75		SP600125
8 - C	PD 98059		Cerulenin		JNK inhibitor VIII
8 - D	U0126		Tunicamycin		Damnacanthal
8 - E	Fumagillin		Deoxynojirimycin		PP2
8 - F	GM 6001		Swainsonine		ERK inhibitor II
8 - G	N-Acetyl-L-cysteine		LY 83583	No	PD98059	No
8 - H	Aminoguanidine, HCl		ODQ		U-0126
9 - A	L-NMMA		Anacardic acid		MEK inhibitor I
9 - B	PD169316		Chetomin	No	SU11274
9 - C	SB 203580		Dimethyloxalylglycine		ML-7
9 - D	Rapamycin		HR22C16		SB202190
9 - E	NU1025		Monastrol		SB239063
9 - F	Benzamide		Nordihydroguaiaretic acid (NDGA)		AG1296
9 - G	D609		ETYA		SU11652	Yes
9 - H	IBMX		Baicalein		PDGF receptor tyrosine kinase inhibitor V
10 - A	Ro-20-1724		Nutlin-3		PDGF receptor tyrosine kinase inhibitor IV
10 - B	Zaprinast		MDM2 inhibitor		LY-294002
10 - C	AG1296		Phenelzine		Wortmannin
10 - D	LY294002		Deprenyl		H-89
10 - E	Wortmannin	No	Decylubiquinone		4-cyano-3-methylisoquinoline
10 - F	H-89, HCl		Ro 5-4864		Bisindolymaleimide I, HCl
10 - G	Bisindolymaleimide I, HCl		Lonidamine		Go7874
10 - H	H-7		ML-7		Rp-8-CPT-cGMPS
11 - A	Staurosporine	Yes	Benzylguanine		KT5823
11 - B	cPLA2inhibitor	Yes	DFMO		PKR inhibitor
11 - C	OBAA		KT 5823		RAF1 kinase inhibitor I
11 - D	Cantharidin	Yes	Rp-8-CPT-cGMPS		ZM 336372
11 - E	Cytostatin		MK 886		H-1152
11 - F	Cyclosporin A		Clofibrate		Y-27632
11 - G	FK-506		BADGE		radicicol
11 - H	MG-132	Yes	Troglitazone		PP1 analog
12 - A	Lactacystin	Yes	AZT		Syk inhibitor
12 - B	Hydroxyurea		Nalidixic acid		SB431542
12 - C	HA1077		a-Amanitin		TGF-b RI kinase inhibitor II
12 - D	Y27632		MST-312		Tpl2 kinase inhibitor
12 - E	PP1 (analog)		b-Rubromycin		TrkA inhibitor
12 - F	PP-H		SB 431542		VEGFR receptor tyrosine kinase inhibitor II
12 - G	Nocodazole		N1,N12-Diethylspermine (BESpm)		VEGF recptor 2 kinase inhibitor I
12 - H	Dephostatin		Fumonisin B1		SU1498