化学療法基盤支援活動及びユーザによる評価結果

アッセイの概要

アッセイID：　B164	報告日：　-	所属：　化学療法基盤支援活動	アッセイ者名：　深澤秀輔	アッセイ名：　プロテインキナーゼ阻害の検定 II-2-4(TRKA)
概要チロシンキナーゼおよびその下流のシグナル伝達系は，多くのがん細胞で活性化しており，抗がん剤の有力な分子標的である．ここでは細胞を血小板由来増殖因子(platelet-derived growth factor, PDGF) 刺激して，活性化されるPDGFレセプターチロシンキナーゼおよびその下流の主要な細胞内シグナル伝達経路に対する検体の阻害効果を評価するとともに，４種類のチロシンキナーゼに対する阻害効果をcell based ELISAを用いて評価する。実験系２：チロシンキナーゼ 293T細胞を96ウェルプレートにまき込み，チロシンキナーゼ（ALK, IGF1R, RET, TRKA）発現プラスミドをトランスフェクトし，チロシンキナーゼを一過性に発現させる。サンプルを添加して3時間処理後，細胞を固定し，cell-based ELISAにより細胞内ホスホチロシンレベルを測定し、コントロールに対する阻害率（％）を表す。
評価のクライテリア 10 μMで50％以上の阻害活性が認められたものを有効とする．
発表論文				レポート提出者によるレポート内容の最終確認日：　-

評価結果の詳細（評価のクライテリアに基づいて陽性と判断された化合物については背景色を黄色にしています．）

Well	KIT 1		KIT 2		KIT 3
Well	compound	結果	compound	結果	compound	結果
1 - A	none (DMSO)	0	none (DMSO)	0	none (DMSO)	0
1 - B	5-FU	0	Pifithrin-a (cyclic)	0	ABT-702	25
1 - C	Bestatin Hydrochloride	9	PRIMA-1	0	Akt Inhibitor IV	76
1 - D	Bleomycin sulfate	0	Finasteride	0	Akt Inhibitor VIII, Isozyme-Selective, Akti-1/2	31
1 - E	Cisplatin	0	Aminoglutethimide	0	Akt Inhibitor XI	16
1 - F	Methotrexate	0	Formestane	0	compound C	39
1 - G	Mitomycin C	0	Mifepristone	0	ATM/ATR kinase inhibitor	72
1 - H	Vinblastine sulfate	13	TOFA	0	ATM kinase inhibitor	33
2 - A	Paclitaxel	46	Amastatin	0	Aurora kinase/cdk inhibitor	23
2 - B	Flutamide	33	Actinonin	4	Aurora kinase inhibitor II	64
2 - C	Daunorubicin, HCl	37	Oligomycin	16	Aurora kinase inhibitor III	21
2 - D	Doxorubicin, HCl	25	Bafilomycin A1	56	AG957	11
2 - E	Tamoxifen, citrate	31	HA 14-1	13	LFM-A13	1
2 - F	Actinomycin D	20	BH3I-1	9	Terreic acid	0
2 - G	Camptothecin	25	LFM-A13	9	KN-93	36
2 - H	Aclarubicin	38	Terreic acid	19	KN-62	0
3 - A	Etoposide (VP-16)	23	E-64d	0	Lavendustin C	19
3 - B	Cytochalasin D	12	ALLN	6	Kenpaullone	16
3 - C	2',5'-dideoxyadenosine	28	CA-074	9	purvalanol A	77
3 - D	AKT inhibitor	18	Pepstatin A	11	Olomoucine	13
3 - E	NL-71-101	12	Z-GLF-CMK	toxic	Alsterpaullone, 2-cyanoethyl	22
3 - F	AG957	23	RS 102895	42	Cdk1/2 inhibitor III	45
3 - G	KN93	57	SB 328437	13	Cdk2/9 inhibitor	14
3 - H	Z-VAD-FMK	26	SB 225002	32	NU6102	0
4 - A	Kenpaullone	28	AMD3100 octahydrochloride	11	Cdk4 inhibitor	66
4 - B	Purvalanol A	77	NSC95397	41	NSC625987	14
4 - C	3-ATA	39	SC-ααδ9	6	SB218078	68
4 - D	Olomoucine	23	Amiloride	11	isogranulatimide	17
4 - E	TBB	15	Lidocaine	11	Chk2 inhibitor	8
4 - F	Sulindac sulfide	26	Monensin	20	Chk2 inhibitor II	0
4 - G	Valeryl salicylate	32	Ouabain	20	Ellagic acid　(Dihydrate)	0
4 - H	NS-398	27	Sanguinarine	toxic	TBB	0
5 - A	Sodium salicylate	27	Glibenclamide	16	DMAT	16
5 - B	Theophylline	28	Dequalinium	15	D4476	15
5 - C	Azacytidine	24	Diazoxide	15	TG003	5
5 - D	Aphidicolin	11	Valinomycin	30	Diacylglycerol kinase inhibitor II	9
5 - E	AG1478	25	Nigericin	4	IC60211	8
5 - F	Genistein	10	Diltiazem	14	TX-1918	0
5 - G	Manumycin A	26	Nifedipine	19	BPIQ-Ⅱ	0
5 - H	FTI-276	33	Verapamil	13	AG1478	0
6 - A	SU1498	38	PGP-4008	9	AG490	14
6 - B	GGTI-286	29	Fumitremorgin C	17	SU4984	62
6 - C	Dexamethasone	32	A23187	toxic	SU5402	76
6 - D	GSK-3 inhibitor II	19	Ionomycin	toxic	Flt-3 Inhibitor	10
6 - E	Scriptaid	17	Thapsigargin	13	cFMS Receptor Tyrosine Kinase Inhibitor	47
6 - F	Trichostatin A	11	t-Butylhydroquinone (BHQ)	23	SU6656	75
6 - G	AG825	22	N-phenylanthranilic acid	24	GSK-3 inhibitor IX	87
6 - H	Cycloheximide	29	DIDS	6	1-Azakenpaullone	0
7 - A	Lovastatin	43	SB 218078	61	Indirubin-3'-monoxime	64
7 - B	Radicicol	76	Debromohymenialdisine (DBH)	0	AG825	14
7 - C	17-AAG	78	Rotenone	46	AG1024	48
7 - D	AG1024	11	Antimycin A1	27	AGL 2263	2
7 - E	1400W, HCl	6	Leptomycin B*	5	BMS-345541	16
7 - F	AMT, HCl	2	R59022	17	IKK-2 inhibitor VI	27
7 - G	AG490	9	Dioctanoylglycol	11	IRAK-1/4 inhibitor	1
7 - H	Cucurbitacin I	toxic	RHC80267	16	JAK Inhibitor I	8
8 - A	SP600125	32	Xanthohumol	3	JAK3 Inhibitor VI	38
8 - B	Damnacanthal	22	C75	1	SP600125	10
8 - C	PD 98059	23	Cerulenin	0	JNK inhibitor VIII	30
8 - D	U0126	14	Tunicamycin	0	Damnacanthal	14
8 - E	Fumagillin	0	Deoxynojirimycin	4	PP2	28
8 - F	GM 6001	0	Swainsonine	6	ERK inhibitor II	4
8 - G	N-Acetyl-L-cysteine	4	LY 83583	46	PD98059	0
8 - H	Aminoguanidine, HCl	21	ODQ	24	U-0126	5
9 - A	L-NMMA	22	Anacardic acid	2	MEK inhibitor I	11
9 - B	PD169316	18	Chetomin	toxic	SU11274	75
9 - C	SB 203580	5	Dimethyloxalylglycine	0	ML-7	12
9 - D	Rapamycin	3	HR22C16	8	SB202190	3
9 - E	NU1025	0	Monastrol	1	SB239063	0
9 - F	Benzamide	2	Nordihydroguaiaretic acid (NDGA)	3	AG1296	0
9 - G	D609	3	ETYA	6	SU11652	68
9 - H	IBMX	19	Baicalein	4	PDGF receptor tyrosine kinase inhibitor V	9
10 - A	Ro-20-1724	19	Nutlin-3	0	PDGF receptor tyrosine kinase inhibitor IV	0
10 - B	Zaprinast	2	MDM2 inhibitor	0	LY-294002	0
10 - C	AG1296	12	Phenelzine	0	Wortmannin	7
10 - D	LY294002	0	Deprenyl	0	H-89	20
10 - E	Wortmannin	0	Decylubiquinone	0	4-cyano-3-methylisoquinoline	0
10 - F	H-89, HCl	0	Ro 5-4864	2	Bisindolymaleimide I, HCl	0
10 - G	Bisindolymaleimide I, HCl	10	Lonidamine	12	Go7874	5
10 - H	H-7	16	ML-7	7	Rp-8-CPT-cGMPS	0
11 - A	Staurosporine	98	Benzylguanine	0	KT5823	15
11 - B	cPLA2inhibitor	0	DFMO	0	PKR inhibitor	31
11 - C	OBAA	0	KT 5823	17	RAF1 kinase inhibitor I	9
11 - D	Cantharidin	0	Rp-8-CPT-cGMPS	0	ZM 336372	9
11 - E	Cytostatin	0	MK 886	0	H-1152	0
11 - F	Cyclosporin A	0	Clofibrate	0	Y-27632	0
11 - G	FK-506	0	BADGE	3	radicicol	71
11 - H	MG-132	3	Troglitazone	0	PP1 analog	0
12 - A	Lactacystin	12	AZT	0	Syk inhibitor	66
12 - B	Hydroxyurea	15	Nalidixic acid	0	SB431542	17
12 - C	HA1077	1	a-Amanitin	0	TGF-b RI kinase inhibitor II	0
12 - D	Y27632	1	MST-312	0	Tpl2 kinase inhibitor	29
12 - E	PP1 (analog)	0	b-Rubromycin	0	TrkA inhibitor	53
12 - F	PP-H	0	SB 431542	0	VEGFR receptor tyrosine kinase inhibitor II	36
12 - G	Nocodazole	5	N1,N12-Diethylspermine (BESpm)	0	VEGF recptor 2 kinase inhibitor I	11
12 - H	Dephostatin	2	Fumonisin B1	6	SU1498	0